1 试验用家兔红细胞要新鲜,最好采血后当天使用,但阿氏液保存的血液也不宜超过两周。
2 因为只有活淋巴细胞才能与家兔红细胞形成玫瑰花环,因此试验用血液要新鲜,随采随做。
3 试验中加入1%小牛血清,能增加
玫瑰花环形成的稳定性。用前须将血清以家兔RBC吸收,以去除对家兔红细胞的天然抗体,否则抑制
玫瑰花环的形成。
4 分离豚鼠单个核细胞所用分层液的比重大小与细胞获得率密切相关,一般以1082~1084最为适宜。
5 淋巴细胞与家兔红细胞比例以1∶40~1∶80较为适宜。
6 用木瓜蛋白酶处理的家兔RBC作RE花环试验,所得RE花环率有一定程度的提高。
7 各淋巴细胞表面的红细胞受体数量和对红细胞亲和力的程度有所不同,即使在同一实验条件下,吸附红细胞的数目也不同。试验中可见到各种形式的花环,如环形花环,即整个淋巴细胞表面均吸附有红细胞,一般在8个以上;不整形花环,即淋巴细胞表面有部分空缺,一般吸附4个细胞以上;有些淋巴细胞仅吸附1~3个红细胞。为避免可能因红细胞重叠在淋巴细胞上而造成误差,故应选择吸附3个以上红细胞为ERFC。
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